介孔SiO2固定化溶菌酶在柴油泄漏循環(huán)水系統中的緩蝕性能

石油學(xué)報(石油加工)2015年10月ACTA PETROLEI SINICA (PET ROLEU M PROCESSING SECTION )第31卷第5期文章編號: 1001-8719(2015 )05-1136-08介孔SiO2固定化溶菌酶在柴油泄漏循環(huán)水系統中的緩蝕性能仲慧贊，劉芳，呂玉翠陸津津，楊偉(中國石油大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院，山東青島266580 )摘要:采用溶膠凝膠法合成了介孔SiO2微球,并采用TEM、BET及FT-IR譜對其進(jìn)行表征。以介孔SiOz微球為載體，利用物理吸附法制備固定化溶菌酶，優(yōu)化了制備條件,并將在優(yōu)化條件下制備的固定化溶菌酶投加于柴油泄漏循環(huán)水中，考察其對碳鋼的緩蝕效果。結果表明，制備固定化溶菌酶的最佳條件為溶菌酶質(zhì)量濃度0.8 g/L、固定化時(shí)間10h、pH值6.5、緩沖溶液摩爾濃度50 mmol/L。在柴油質(zhì)量濃度為80 mg/L的冷卻循環(huán)水中，固定化溶菌酶對碳鋼的緩蝕率最高可達78. 21%，且穩定性比游離溶菌酶有顯著(zhù)提高。關(guān)鍵詞:介孔SiO2微球;固定化;溶菌酶;柴油泄漏;循環(huán)冷卻水;緩蝕中圖分類(lèi)號: TQ085; Q71文獻標識碼: Adoi: 10. 3969/j- issn. 1001-8719. 2015. 05. 018Corrosion Inhibition of Lysozyme Immobilized on Mesoporous SiOz inCirculating Cooling Water System With Diesel LeakageZHONG Huiyun, LIU Fang, LU Yucui, LU Jinjin, YANG Wei(College of Chemical Engineering, China Universily of Petroleum ，Qing dao 266580, China)Abstract: M esoporous SiO2 microspheres were synthesized by usingsol-gel method, andcharacterized by TEM，BET and FT-IR. Lysozyme w as immobilized on mesoporous SiOz throughphy sical adsorption and the conditions of immobilization w ere optimized . The immobilized ly sozy meprepared under optimal conditions was used as corrosion inhibitor in cooling circulating water withdiesel leakage . The results show ed that the optimal preparation conditions for immobilized ly sozy mew ere lysozy me mass concentration of 0. 8 g/L , immobilization timeof 10 h, thepH value of 6. 5 andthe buffer molar concentration of 50 mmol/L. In the cooling circulating water containing diesel of80 mg/L and with immobilized lysozy me as corrosion inhibitor , the highest corrosion inhibition ratefor carbon steel was 78. 21%，and the stability of immobilized lysozyme had increased obviouslycompared to free ly sozyme .Key words : mesoporous SiO2 microspheres ; immobilization; lysozy me; diesel leakage; circulatingcooling water ; corrosion inhibition在我國石油煉化企業(yè)中，由于密封技術(shù)落后、普遍存在著(zhù)油品泄漏問(wèn)題”。油品附著(zhù)于管壁上，換熱器質(zhì)量差、管線(xiàn)老化、操作不當等原因，形 成中國煤化工嚴重的點(diǎn)蝕。油品泄YHCNMHG.收稿日期: 2014-06-06基金項目:國家自然科學(xué)基金項目(21077133)和中國石油大學(xué)研究生創(chuàng )新工程項目(CX2013039)資助第一作者:仲慧資，女，碩士研究生，從事水污染控制與資源化利用方面的研究; E- mail: huiy un0102@ 126. com通訊聯(lián)系人:劉芳，女，教授，從事高濃度有機廢水的深度處理及回用技術(shù)方面的研究; E- mail : liufangfw@ 163. com第5期介孔SiO2固定化溶菌酶在柴油泄漏循環(huán)水系統中的緩蝕性能1137漏下,投加常規的緩蝕劑不能達到高效的緩蝕效2. 38 pug/g 和0.91 μg/g。果，因此，需要篩選適用于油品泄漏情況下的新.實(shí)驗用循環(huán)水，取自青島某煉化企業(yè)的循環(huán)冷型緩蝕劑。卻水系統。溶菌酶(Lysozyme, EC 3.2. 1.17)是一種專(zhuān)門(mén)1.2介孔 SiO2微球的制備及表征作用于微生物細胞壁的水解酶523]，是一種有效的抗采用溶膠凝膠法制備介孔SiO2微球1-1212。菌劑，能引起細菌裂解(5]，又稱(chēng)胞壁質(zhì)酶或N-乙25°C下，1.5 g CTAB溶于300 mL蒸餾水中，磁力酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶。根據來(lái)源不同可將溶菌酶分攪拌至澄清，加入75 mL無(wú)水乙醇攪拌10 min;逐為動(dòng)物源溶菌酶、植物源溶菌酶和微生物源溶菌酶滴滴加13mL氨水，攪拌15min;逐滴加入5mL3類(lèi)"。Fleming 等在1922 年發(fā)現了溶菌酶°]，TEOS,持續攪拌2h。將得到的乳白色渾濁液陳1965年，英國的菲利普弄清了溶菌酶完全的立體結化，過(guò)夜;抽濾，先水洗后乙醇洗，用AgNO3檢構”。譙康全等8研究了硫酸介質(zhì)中溶菌酶對Q235驗濾液直至沒(méi)有沉淀為止。將得到的白色沉淀于鋼的緩蝕作用，結果表明，在酸性條件下溶菌酶對90°C干燥、研磨、550°C 下焙燒5 h，即得到介孔Q235鋼有顯著(zhù)的緩蝕作用。然而，游離的溶菌酶SiO2微球樣品。穩定性較差，易受環(huán)境條件影響而失活，且難以實(shí)分別采用日本日立公司JEM2100型透射電子顯現重復利用。因此，對溶菌酶進(jìn)行固定化是實(shí)現其微鏡、美國ASAP2020 型比表面測試儀、美國.廣泛利用的有效途徑。Thermo Nicolet 公司N EXUS型傅里葉變換紅外光介孔材料不僅具有較大的孔徑，同時(shí)還具有高譜儀表征所制備的介孔SiO2微球樣品。比表面積和大吸附容量，與傳統的微孔材料相比，1.3 溶菌酶的固定化更有利于分子的快速擴散，使之能為大分子(如石油采用物理吸附法固定化溶菌酶。將- -定量的介化工中重油有機分子、生物酶分子等)的反應、酶的孔Si02微球樣品加至含有一定濃度溶菌酶的固定化提供適宜的空間，在催化、吸附、光、電、Naz HPO4-KH2P0+緩沖溶液中，30°C下振蕩一定磁等許多領(lǐng)域有著(zhù)廣泛的應用價(jià)值9-101。時(shí)間;抽濾，洗去多余的溶菌酶，得到白色沉淀;筆者以十六烷基三甲基溴化銨為模板劑，采用在30C-下烘干白色沉淀，即得到固定化溶菌酶溶膠凝膠法合成介孔SiO2微球;以此為載體，制樣品。備固定化溶菌酶，優(yōu)化了固定化條件，并初步考察1.4溶菌 酶的相對活性測定其在柴油泄漏循環(huán)水中對碳鋼的緩蝕效果，為溶菌溶菌酶可以?xún)惹械姆绞阶饔糜跉ぞ厶?，斷開(kāi)酶的工業(yè)化利用提供理論和技術(shù)支持。殼聚糖上的p1,4-糖苷鍵，因此，通過(guò)測定溶液中還原糖的濃度，就可間接求出溶菌酶的活1實(shí)驗部分力13141。取6 mLpH值為4.5、質(zhì)量濃度為1.1 原料和試劑1.2 g/L的羧甲基殼聚糖溶液與0.1 g固定化溶菌溶菌酶，生化試劑，M= 14400，酶活力大于酶在55C反應60 min后，抽濾;取5 mL上清液于10000 U/mg，山東蘇柯漢生物工程股份有限公司產(chǎn)具塞試管中，加入1 mL堿性鐵氰化鉀溶液，混合品;十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)、正硅酸乙酯搖勻，在沸水中煮沸10 min;冷卻，以試劑空白(TEOS)、羧甲基殼聚糖、鐵氰化鉀、無(wú)水乙醇、作參比，420 nm波長(cháng)處測其吸光度A，用以計算磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀等，均為分析純，國藥集固定化溶菌酶的相對活性，簡(jiǎn)稱(chēng)相對酶活(Relative團化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品。activity )。直餾柴油，購于江蘇新海石化有限公司，20C在同組宜驗中以I晶士吸光度(A際)的固定化密度為0. 8392 g/em’，屬于輕質(zhì)柴油。35°C 下黏度溶菌MH中國煤化工其余樣品的相對酶活較小，為3.26mm2/s，因此當其泄漏到循環(huán)水中，為其. C NMH G百分數表示。經(jīng)過(guò)曝氣循環(huán)后，能夠與水很好地混合，并有一部1.5 循環(huán)水水質(zhì)分析方法分溶解于水。柴油中Zn和Fe的質(zhì)量分數分別為循環(huán)水水質(zhì)分析方法列于表1。1138石油學(xué)報(石油加工)第31卷表1循環(huán)冷卻水水質(zhì)分析方法Table 1 Water quality analysis method for cooling circulating waterWater quality parameterEx perimental met hod and standardsTurbidity/NTUPortable turbidity plan method (LP2000-11)pH valuepH indicator electrodep(Ca2+ )/(mg. L 1)EDTA titration (GB/T 15452-95 )pρ(Mg2+ )/(mg. L-1)EDTA titration (GB/T 15452-95 ) .p(CI~ >/(mg. L-1)Nitrate radical titration method (GB/T 15453-95)p(SOf )/(mg.L 1)Gravimetric analysis (GB/T 15893. 3-1995 )ρ(Total iron)/(mg. L-1)Spectrophotometrie o phenanthrolineTotal hardness in CaC03/(mg. L 1)Total alkalinity in CaC03/(mg. L- 1 )Indicator method (GB/T 15451-95 )1.6 生物酶緩蝕性能測定式(1)、(2)中， m為試片質(zhì)量損失，g; m為空白實(shí).參考GB/T18175-2000旋轉掛片法測定生物酶驗試片的質(zhì)量損失平均值，g; s為試片的表面積，的緩蝕性能。選用A3碳鋼掛片(50 mmX25 mmXcm2 ; ρ為試片的密度，g/cm^; l為實(shí)驗時(shí)間，h;2mm)作為腐蝕對象，利用RCC-I型旋轉掛片腐蝕8760為與1 a相當的小時(shí)數，h/a; 10為與1 cm相試驗儀進(jìn)行腐蝕實(shí)驗。以含柴油質(zhì)量濃度為當的毫米數，mm/cm; Xo和Xi分別為空白實(shí)驗和80mg/L的循環(huán)水模擬循環(huán)水系統介質(zhì)泄漏。在該加劑實(shí)驗中試片的腐蝕速率，mm/a。系統中加人不同質(zhì)量的固定化溶菌酶，置于哈爾濱2結果與討論東聯(lián)電子技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司立體恒溫振蕩器中，在2.1所制備的介孔SiOx的表征結果溫度40°C、轉速80 r/min的條件下運轉72 h。對掛片進(jìn)行清洗處理，稱(chēng)重，計算其質(zhì)量損失，同時(shí)進(jìn)2.1.1 形貌行空白實(shí)驗。分別以式(1)、(2 )計算碳鋼的腐蝕速圖1為介孔SiO2 微球樣品的TEM照片。從圖1(a)可以看出，所制備的介孔SiOz是- -些形狀率(XI )和固定化溶菌酶對碳鋼的緩蝕率(X2 )。比較規則的圓形顆粒，顆粒粒徑在150- 200 nm范8760X (m-mo )X10_ 87600X(m-mo )S.ρ°l圍，大小不-一，分散性不太好，顆粒呈現堆積、掩(1)蓋狀態(tài)。圖1(b)為一個(gè)完整顆粒的高分辨圖片，可以清楚地觀(guān)察到其具有介孔狀結構，孔道呈發(fā)散的x2=X0=Xx 100%(2)Xo蠕蟲(chóng)狀。a)b)中國煤化工100 nmYHCNMHG2omm圖1介孔 SiO微球樣品的TEM照片Fig 1 TEM photos of mesoporous SiO2 microspheres sample(a) and (b) are the TEM photos at different magnification times.第5期介孔SiO2固定化溶菌酶在柴油泄漏循環(huán)水系統中的緩蝕性能11392.1.2 BET 比表面性質(zhì)附量隨著(zhù)p/po的增加不斷增大，在0.2~0.3范圍圖2為介孔SiO2微球樣品的N2吸附-脫附等溫有一個(gè)快速的上升，這是由介孔里N2的毛細凝聚線(xiàn)和孔徑分布。引起的。脫附等溫線(xiàn)與吸附等溫線(xiàn)一致， 說(shuō)明介孔根據BDDT (Brunauer deming deming teller )分SiO2微球具有很好的介孔特性。BET測試得到介孔類(lèi)，圖2(a)顯示的N2吸附-脫附等溫線(xiàn)的起始段斜SiO2微球的比表面積為1088.9 m2 /g率變化由大到小，是典型的IV型等溫線(xiàn)，屬于多從圖2(b)看出，介孔SiOz微球的孔徑分布在孔物質(zhì)發(fā)生多分子層吸附時(shí)特有的等溫線(xiàn)15。在一2~ ~3 nm之間，平均孔徑為2. 55 nm;孔徑分布曲線(xiàn)定范圍的p/p下出現滯后環(huán)，是非氣孔型固體表呈單峰狀，并且半峰寬較窄，說(shuō)明樣品的孔徑均勻，面的氣體物理吸附引起;由于多層吸附的存在,吸其結構為介孔狀。600.4r(a(b).2 t20 500.0 t4000 0.8-300.6-- Desorption0.4-。Adsorption2001000.20.6.0p/p。D./nm圖2介孔 SiO2微球樣品的N2吸附-脫附等溫線(xiàn)和孔徑分布Fig 2 N2 adsorption desorption isotherms and pore size distribution of mesoporous SiO2 microspheres(a) N2 adsorption- desorption isotherms; (b) Pore size distribution2.1.3 FT-IR 分析圖3為介孔SiO2微球的FT-IR譜。從圖3可以制備的樣品為SiO2?？闯?，464 cm-' 附近有一窄而尖的峰，歸屬于2.2介孔 SiO.固定化溶菌酶的制備條件優(yōu)化Si- 0- Si的伸縮振動(dòng)，800 cm 1 附近的吸收峰歸屬2.2. 1溶菌酶給酶 量的優(yōu)化于Si-0-Si的彎曲振動(dòng)，933cm1附近的吸收峰取等量介孔SiO2，投加到不同質(zhì)量濃度溶菌酶歸屬于Si- 0的伸縮振動(dòng); 1087 cm^ I 附近有- -強 且的NaHPO4-KHzPO. 緩沖溶液(50 mmol/L,尖銳的峰，歸屬于硅氧烷中Si- 0- Si 的不對稱(chēng)振pH值7.0)中，其他條件相同，進(jìn)行溶菌酶的固定動(dòng); 1639 cm~附近的吸收峰歸屬于Si02表面吸水化，得到的固定化溶菌酶的相對酶活示于圖4。后形成的氫鍵，3415 cm 1 附近的吸收峰歸屬于硅醇Si- 0H及表面吸附水的一0H 振動(dòng)。由此證明，所g‘0te 800(0η影60& 50一中國煤化工YHCNMHG10121.4 7.6pLysuzylme)/(g:L)4000350030002500200015001000500 0圖4溶菌酶質(zhì)量濃度(ρ)對固定化溶菌酶相對酶活的影響Wave number 1 cmr'Fig 4 Effect of lysozyme mass concentration (ρ) on圖3介孔 SiO2微球的FT-IR譜the relative activity of immobilized lysozymeFig. 3 FT-IR spectrum of mesoporous SiO2 microspheresm(Si02)=0.1 g; pH=7.0; c(Buffer)= 50 mmol/L1140石油學(xué)報(石油加工)第31卷由圖4看到，隨著(zhù)溶菌酶質(zhì)量濃度的增加，固2.2.3 pH 值的優(yōu)化定化溶菌酶的相對酶活逐漸增大，當溶菌酶質(zhì)量濃取等量介孔SiO2投加到溶菌酶質(zhì)量濃度為度為0.8 g/L時(shí)，相對酶活達到最大;繼續增加給0.8 g/L的Na HPO+- KH PO+緩沖溶液(50 mmol/L)酶量，相對酶活反而略有下降。陳建龍161利用空氣中，室溫振蕩10h,考察固定化pH值對固定化酶玻纖濾材進(jìn)亍溶菌酶固定化時(shí)也發(fā)現，隨著(zhù)給酶量增相對酶活的影響，結果示于圖6。從圖6可以看出，大，固定化酶活性先增大后減小。這是因為溶菌酶質(zhì)介孔SiO2固定化溶菌酶的最佳pH值為6.5。pH量濃度增加，使固定在介孔SiO2上的酶量相應增加;值增大或減小都會(huì )使固定化溶菌酶的相對酶活降低。然而，隨著(zhù)載體負載酶量的增大，酶分子相互擁擠造105成的空間位阻也增大，使溶菌酶活性中心互相遮蓋,100底物與產(chǎn)物也不能及時(shí)擴散，因此，超過(guò)- -定溶菌酶)5 t質(zhì)量濃度后，固定化酶的活性反而下降。固定化溶菌)0 t酶最佳的溶菌酶質(zhì)量濃度為0.8 g/L。2.2.2固定 化時(shí)間的優(yōu)化80 t取等量介孔SiOz,投加到溶菌酶質(zhì)量濃度為75 t70 t0.8 g/L的Na HPO-KH2 PO:緩沖溶液(50 mmol/L,pH值7.0)中，室溫下考察固定化時(shí)間對固定化溶650 55 60.57.7.58.Immobilization pH value菌酶相對酶活的影響，結果示于圖5。圖6固定化 pH值對固定化酶相對酶活的影響Fig. 6 Effect of immobilization pH value on10the relative activity of immobilized lysozymege 95m(Si02)=0.1 g; p(Lysozyme)=0.8 g/L;e 90r=10 h; c(Buffer )= 50 mmol/L85-g 80-劉慧等171的研究表明，溶菌酶的最適pH值在.6~6.5范圍，在5~7范圍內酶活性相對比較穩定，55 t而大于7時(shí)酶活性急劇下降，當pH值為8時(shí),相05012對酶活下降至10%左右。本實(shí)驗結果與其研究大致Immobilized time/ h相符。然而pH值低于6.5時(shí)，固定化溶菌酶的相圖5固定化時(shí) 間對固定化溶菌酶相對酶活的影響對酶活下降較大，pH值為5.4時(shí)，相對酶活下降Fig. 5 Effect of immobilized time on the relative activity of至71.74%。這是因為酸性條件下，溶菌酶活性中.immobilized lysozyme心氨基酸的解離狀態(tài)可能不利于酶活性的充分發(fā)揮;m(Si02)=0.1 g; pH=7.0; dLysozyme)=0.8 g/L;c(Buffer )= 50 mmol/L .同時(shí)，溶菌酶的等電點(diǎn)為pH值10.8左右，在酸.性條件下表面帶正電荷，使酶分子與介孔SiO2表面從圖5可以看出，隨著(zhù)固定化時(shí)間的延長(cháng)，固的硅羥基的相互作用減弱。定化酶的相對酶活先增大后減小;當吸附時(shí)間為2. 2. 4緩沖液濃度的優(yōu)化10 h時(shí)，相對酶活達到最大。固定化時(shí)間小于10 h取等量介孔Si02,投加到溶菌酶質(zhì)量濃度為時(shí)，隨著(zhù)時(shí)間的延長(cháng)，溶菌酶的吸附量逐漸增大，0.8 g/L的Na HPO4-KHzPO+ 緩沖溶液(pH值因此相對酶活逐漸增大;當固定化時(shí)間為10 h時(shí),6.5)中。在室溫振蕩10h條件下，考察緩沖液濃度反應達到吸附平衡，相對酶活達到最大;固定化時(shí)對固MYH中國煤化工結果示于圖7。間超過(guò)10h后，雖然溶菌酶固定量增大，但與給酶. CN M H G摩爾濃度為50 mmol/L量過(guò)大效果類(lèi)似，溶菌酶分子相互擁堵，使溶菌酶時(shí)，固定化溶菌酶的相對酶活最高，當濃度高于活性中心互相遮蓋，因此，超過(guò)一-定時(shí)間后，固定50 mmol/L時(shí)，固定化溶菌酶的相對酶活下降明顯?；傅南鄬γ富罘炊陆?。制備固定化溶菌酶最佳這是因為當緩沖液摩爾濃度為25 mmol/L時(shí)，緩沖效的固定化時(shí)間為10 h。果較弱,不能保證溶菌酶固定化時(shí)的穩定環(huán)境,因此第5期介孔SiO2固定化溶菌酶在柴油泄漏循環(huán)水系統中的緩蝕性能1141105固定化效果較摩爾濃度為50 mmol/L時(shí)差;而當緩沖100液摩爾濃度高于50 mmol/L時(shí)，由于濃度過(guò)高，蛋白亞基之間的相互作可能會(huì )遭到破壞，引起亞基解離，90 t同時(shí)，會(huì )影響酶分子與介孔SiOz表面的吸附作用力,85 "從而影響酶的固定化效果。另外，當濃度過(guò)高時(shí)，可80|能導致電荷屏蔽作用，使底物分子不能接近酶的活性5t中心，從而降低了固定化溶菌酶的催化效率，使相對70 t酶活降低。因此優(yōu)選緩沖液摩爾濃度為50 mmol/L。65204060801001201401601802002.3 固定化溶菌酶的緩蝕性能c(Buffer)/ (mmol:L)圖7緩 沖液摩爾濃度對固定化酶相對酶活的影響2.3. 1實(shí)驗用循環(huán)水水質(zhì)fig. 7 Influence of buffer molar concentration on一般情況下，循環(huán)水是中性和弱堿性的，the relative activity of immobilized lysozymepH值控制在7~9.5之間。實(shí)驗循環(huán)水的水質(zhì)分析m(Si02)=0.1 g; e(Lysozyme)=0.8g/L; =10 h;pH=6.5結果列于表2。表2實(shí)驗用循環(huán)水水質(zhì)Table 2 The quality of circulating water for experimentTurbidity,plon)/(mg. L-1 )Total hardness' )Total alkalinity'/pH value .NTUCa2+Mg2 'CI-S0?Total iron(mg. L-1)(mg●L-1)8.915.0281.6837. 60303.25260. 32392. 71350. 211) Based on CaCO32.3.2柴油投加量的確定繼續增加，對異養菌產(chǎn)生了毒性，從而使細菌總數向2 L燒杯中加入1 L循環(huán)水，并向其中投加降低，減緩了碳鋼的腐蝕速率。不同量的柴油，按1.6節中所述方法進(jìn)行腐蝕實(shí)驗，循環(huán)冷卻水中的油一-般以分散態(tài)、乳化態(tài)或溶測定碳鋼的腐蝕速率，結果示于圖8。解態(tài)的形式存在，當油含量較高時(shí)可通過(guò)物理或化學(xué)方法破乳，最后的濃度往往較低。此外，由圖8.0.25可知，碳鋼在柴油質(zhì)量濃度為80 mg/L的循環(huán)水中0.20- λ的腐蝕速率最高，故選擇80 mg/L作為模擬柴油泄漏腐蝕實(shí)驗的柴油質(zhì)量濃度。0.152.3.3固定化溶菌酶的緩蝕效果三0.10向2 L燒杯中加入1 L循環(huán)水，向其中投加少0.05許柴油，使柴油的質(zhì)量濃度為80 mg/L，并分別加人不同量的固定化溶菌酶進(jìn)行腐蝕實(shí)驗，測定碳鋼160320480 640 800 96011201280的腐蝕速率和固定化溶菌酶對碳鋼的緩蝕率，結果p(Diesel)/ (mgL)示于圖9。圖8含不同質(zhì) 量濃度柴油循環(huán)水中碳鋼的腐蝕速率(Xi )從圖9可以看出，隨著(zhù)固定化溶菌酶質(zhì)量濃度Fig. 8 The corrosion rate (X ) of carbon steel in的增加碳鋼的腐蝕速離下降明顯，相應的緩蝕率circulating water with different mass concentrations of diesel從圖8可以看出，隨著(zhù)循環(huán)水中柴油質(zhì)量濃度逐漸MYH中國煤化工5g/L時(shí)，緩蝕率達.. CNMH G質(zhì)量濃度至0.7 g/L的不斷增加，碳鋼的腐蝕速率呈現先上升后下降的時(shí)，緩蝕率為78. 21%。趨勢。這是因為低濃度的柴油能為異養菌的生長(cháng)提盧憲輝等203研究表明，使用游離溶菌酶進(jìn)行腐供碳源等營(yíng)養條件，使細菌總數高于未投加柴油蝕實(shí)驗時(shí)，雖緩蝕效果明顯,但隨著(zhù)溶菌酶質(zhì)量濃時(shí)[18]，創(chuàng )造產(chǎn)生點(diǎn)蝕的環(huán)境”;隨著(zhù)柴油濃度的度增加， 呈現先增大后減小的波動(dòng)變化，即游離溶1142石油學(xué)報(石油加工)第31卷菌酶性質(zhì)不穩定。這主要是由于循環(huán)冷卻水的pH2012，28 (5 ): 883-888. (LIU Fang， YANG Fei,值一-般為7~9.5，在此范圍內，游離溶菌酶的活性WANG Feiyang， et al. Effects of oil leakage ir穩定性較差[”'。實(shí)驗表明，固定化溶菌酶的穩定性circulating cooling w ater system on biofouling grow thcharacteristics [ J ]. Acta Petrolei Sinica ( Petroleum較游離溶菌酶有了顯著(zhù)提高。Processing Section), 2012, 28(5): 883-888.) .0.2280[2]尹金風(fēng)，史鋒,王小元.蛋清溶菌酶與滲透劑對大腸桿0.2070菌的協(xié)同抑菌作用[J].食品科學(xué), 2011, 32(11); 176-0.18180. (YIN Jinfeng， SHI Feng， WANG Xiaoyuan .| 600.14--●- X。。Sy nergistic antibacterial effect of lysozyme with cell0.120permeabilizers on escherichia coli [J ]. Food Science ,弋0.10-402011, 32(11): 176-180.)0.08[3] CALLEWAERT L, MICHIELSC W . 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New York: Worth的酶分子直接分散在循環(huán)水中，而固定化溶菌酶的Publishers, 1993: 180-312 .酶分子在介孔SiO2表面吸附，降低了與循環(huán)水中細[7]肖懷秋，林親錄，李玉珍，等.溶菌酶及其在食品工業(yè)中的應用[J].中國食物與營(yíng)養，2005, (2): 32-34.菌的接觸能力，從而影響了其緩蝕效果。(XIAO Huaiqiu， LIN Qinlu， LI Yuzhen， et al .3結論Application of lysozyme in the food industry [J]. Foodand Nutrition in China .2005, (2): 32-34. )采用溶膠-凝膠法合成了介孔SiOz微球，其粒[8]譙康全，吳永強,劉新露。溶菌酶在硫酸介質(zhì)中對徑在150~ ~200 nm范圍，表面平均孔徑為2. 55 nm,Q235鋼緩蝕行為的研究[J].腐蝕與防護，2012, 33比表面積為1088.9 m2 /g。利用物理吸附法固定化(6 ): 478-481. (QIAO Kangquan， WU Yongqiang，溶菌酶,確定固定化的最佳條件為溶菌酶質(zhì)量濃度LIU Xinlu . Corrosion inhibition behav ior of lysozyme on0.8 g/L、固定化時(shí)間10h、pH值6.5、緩沖溶液Q235 steel in H2SO4 solution [ J ]. Corrosion &摩爾濃度50mmol/L。在模擬柴油泄漏循環(huán)冷卻水Protection, 2012, 33(6): 478-481.)的腐蝕實(shí)驗中，當柴油投加質(zhì)量濃度為80 mg/L[9]LEEC，LIN T，MOU C. Mesoporous materials forencapsulating enzymes[J]. Nano Today，2009, 4(2 );時(shí)，固定化溶菌酶對碳鋼的緩蝕率最高可達165-179.78. 21%，且穩定性較游離溶菌酶有顯著(zhù)提高;然[10]呂勇軍，李佩晉,郭楊龍，等.酶在有序介孔材料上的而，其最高緩蝕率較游離溶菌酶的最高緩蝕率中國煤化工18，20(7-8): 12-1179.(83%)低，表明固定化溶菌酶對細菌的親和力較游MYHCNMHGGUO Yanglong，et al.離溶菌酶弱。Immobilization ot enzymes on mesoporous materials[J」.Progress in Chemistry , 2008，20(7-8): 1172-1179.)參考文獻[11]楊沖.介孔二氧化硅的制備及銀的負載性研究[D].南[1]劉芳，楊飛,王飛揚，等.油品泄漏對循環(huán)冷卻水系統京:南京理工大學(xué)，2010.生物黏泥生長(cháng)特性的影響[J].石油學(xué)報(石油加工)，[12] 方欣閃.介孔二氧化硅微球的制備[J].長(cháng)春理工大學(xué)第5期介孔SiO2固定化溶菌酶在柴油泄漏循環(huán)水系統中的緩蝕性能1143學(xué)報(自然科學(xué)版)，2010， 33(2): 90-93. (FANG[17]劉慧，王風(fēng)山，楚杰.蛋清溶菌酶部分酶學(xué)性質(zhì)及酶活Xinshan. Preparation of mesoporous silica microsphere性的影響因素研究[J].中國生化藥物雜志，2008, 29[J]. Journal of Changchun University of Science and(6): 385-391. (LIU Hui， WANG Fengshan, CHUTechnology (Natural Science Edition )，2010， 33 (2):Jie. Study on some enzy mological properties and activity90-93.)influencing factors of egg white lysozyme [J ]. 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