131Ⅰ標記NGR聚乙二醇修飾物及其生物分布

第27卷第2期核化學(xué)與放射化學(xué)Vol. 27 No. 22005年5月Journal of Nuclear and RadiochemistryMay 2005文章編號:0253- 9950( 2005)02- 0075-07131I標記NGR聚乙二醇修飾物及其生物分布楊順龍，褚泰偉，劉新起，王祥云北京大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院應用化學(xué)系.北京100871摘要:天門(mén)冬酰胺酰甘氨酰精氨酸(NGR)是特異性地定位于腫瘤新生血管受體的多肽基序,在腫瘤診斷和治療方面具有潛在的應用前景。首先用兩種單甲基化聚乙二醇(mPEG100,mPEG000)對YGGCNGRC環(huán)肽進(jìn)行化學(xué)修飾,并進(jìn)行1"I標記?？疾炝诉@些標記物在正常小鼠以及荷乳腺癌MCF-7裸鼠體內的分布。結果表明，1"I -mPEG- YGGCNGRC和"1 I -mPEG00 YGGCNGRC在各個(gè)器官和組織中的攝取率與”I-YGGCNGRC相比都有所降低,但在腎臟中的攝取率增高。血液初始攝取稍有下降,從血液中清除的速率則無(wú)顯著(zhù)差別。用mPEGs000修飾的NGR環(huán)肽顯著(zhù)地降低了1I的脫落。雖然!'I -mPEG000 YGGCNGRC在腫瘤中的攝取比31I-YGGCNGRC稍低,但腫瘤組織與正常組織的攝取比對多數器官和組織都有所提高,其中腫瘤與肌肉的攝取比由3.5士1.7提高到5.7士2.2。修飾與否對腫瘤與血的攝取比影響不大，由0. 73士0.33變化至0.80士0. 22。關(guān)鍵詞:腫瘤新生血管; NGR多肽;聚乙二醇;3I標記;生物分布中圖分類(lèi)號: O615. 42文獻標識碼: A1998年Arap等[1用噬菌體展示技術(shù)篩選到( mPEGsoo, mPEGs00)修飾含NGR序列的具有腫瘤新生血管靶向性的天門(mén)冬酰胺酰甘氨酰YGGCNGRC (酪氨酸-甘氨酸甘氨酸半胱氨精氨酸短肽(NGR),它的受體為主要表達在腫瘤酸天冬酰氨-甘氨酸精氨酸半胱氨酸)環(huán)肽,并新生血管上的CD13/氨基肽酶N[2]。將NGR和進(jìn)行"I標記，以考察它們在小鼠體內的生物分腫瘤壞死因子(TNF)相連后，可以導向性地把藥布和腫瘤的攝取。物帶入腫瘤血管,NGR-TNF的抗腫瘤效果比TNF強30倍[3];并且NGR-TNF只與腫瘤血管1實(shí)驗部分上的CD13受體結合,而在表達CD13受體的正常腎臟和骨髓細胞中不結合[4。腫瘤的生長(cháng)和轉1. 1儀器和試劑移依賴(lài)于新生血管的生成°]，因此NGR短肽在腫YGGCNGRC環(huán)肽和N,N’-羰基二咪唑瘤診斷和治療方面具有潛在的應用前景。(CDI),吉爾生化(.上海)有限公司;單甲基化聚乙聚乙二醇(PEG)修飾多肽和蛋白藥物具有很二醇(mPEG),分子量5000,美國Sigma化學(xué)公多優(yōu)點(diǎn),如可以改善藥物的體內分布,保護藥物不司,分子量1900,Alfa Aesar公司;1,3,4,6-四氯-受蛋白酶的攻擊，降低藥物的抗原性等[6]。3a,6a二苯甘脲(lodogen),美國Sigma化學(xué)公ChenE7]等報道,采用小分子量mPEG200修飾的精司;Nal31I (無(wú)載體溶液)由中國原子能科學(xué)研究氨酰甘氨酰天門(mén)冬氨酸(RGD)短肽在血中的清院提供。正常雄性昆明小鼠(20士2)g,中國科學(xué)除速度加快,腫瘤攝取隨著(zhù)時(shí)間延長(cháng)而增加。完中國煤化工泉癌BALB/C雄性裸.本文用兩種分子量的單甲基化聚乙二醇鼠| YHCNMHG院提供。收稿日期:2004-12-06;修訂日期:2005-03-10基金項目:國家自然科學(xué)基金資助項目(20301001)作者簡(jiǎn)介:楊順龍(1982- ), 男,江西景德鎮人,碩士研究生,應用化學(xué)專(zhuān)業(yè)。76核化學(xué)與放射化學(xué)第27卷Waters 600E高效液相色譜儀,美國WatersSimplicity 185純水儀,美國Millipore 公司產(chǎn)品;公司;Radiomatic500TR液體閃爍計數器,自動(dòng)CRC -15R放射性活度計,美國Capintec公司產(chǎn)品。γ計數器( Packard auto-gamma cobra II series1.2 mPEG-CDI活化物的合成counting system),均為美國Packard 公司產(chǎn)品;按文獻[8,9]的方法合成。合成反應式FD-1冷凍干燥機,北京博醫康技術(shù)公司產(chǎn)品。如下:0OH +<)n心，mPEGCDImPEG-CDI將2.25 g mPEG00o(0. 45 mmol)和0.38 g1.3.1 131I- YGGCNGRC的制備將50μgCDI(2.3 mmol)溶于12 mL DMF中,室溫下攪拌6h后。冷凍干燥除去溶劑DMF,殘余的乳黃YGGCNGRC環(huán)肽溶于45 μL磷酸鹽緩沖溶液色固體用5 mL二氯甲烷溶解后,加入到50 mL中(pH=7.4),然后放入已涂好100 ug lodogen乙醚中,出現大量白色沉淀。攪拌30 min后過(guò)濾的1 mL聚丙烯管中,再加入13. 5 MBq Nal31 I,得到白色固體，將白色固體采用上述方法再處理漩渦振蕩混勻后反應5 min。反應混合物使用兩次,過(guò)濾后得到的白色固體,冷凍干燥。最終產(chǎn)RP- HPLC分離; Waters Symmetry Cs柱(5 μm,品1.87 g,產(chǎn)率81.4 %。φ3.9mmX150mm),流速1mL/min,梯度淋洗,1 HNMR (DMSO-d，δ): 3.24 (mPEG上的時(shí)間0~25 min,由90 %溶劑A(1 %三氟乙酸的-CH3);3. 32 ~ 3. 78 (mPEG中的重復單元水溶液)和10%溶劑B(1%三氟乙酸的乙腈溶CH2CH2O- -);4. 50(mPEG羥基一端相連的.液)淋洗至35%溶劑A和65%溶劑B,放射性計CH2O- -);7. 09,7. 60,8. 26(咪唑環(huán)上的3個(gè)數檢測。用1.5 mL聚丙烯管收集流動(dòng)相,每管1CH=)。mL,收集放射性最高的1 mL流動(dòng)相。真空干燥mPEG1g00 -CDI活化物與mPEGs000 -CDI活化除去乙腈,稀釋至740kBq/mL備用。物合成方法一樣,產(chǎn)率30. 5%。1.3.2 131 I -mPEG- YGGCNGRC的制備 按1.3131I- YGGC NGRC和131 I -mPEG-文獻[8,9]方法合成。合成反應式如下:YGGCNGRC的制備HOOC-Cys、HOOC- - Cys、> ArgArgmPEG-CDI +Gly”o,Asn一AsnH2N- Tyr- Gly- Gly- -Cys"HN- Tyr- -Gly- -Gly- -Cys"將31I- YGGCNGRC標記液加入1 mL聚各取131 I- YGGCNGRC ,131 I -mPEG10-丙烯管中，再加入1.5mgmPEG00-CDI(0. 29 pumol)或0.6 mg mPEG1900 CDI(O. 30 pumol), .中國煤化工G50o- YGGCNGRC振蕩混勻,室溫下靜置反應6 h。上述反應液用CNMHG分別通過(guò)尾靜脈注射.RP-HPLC分離。用1.5mL聚丙烯管收集流動(dòng)到止吊小鼠體內，仕個(gè)同時(shí)相分別進(jìn)行小鼠眼眶相,每管1 mL,取放射性最高的2管合并。真空.取血,斷頸處死,取出心、肺、肝、腎、脾、胃、腦和肌肉等,用自動(dòng)γ計數器測量放射性計數。每個(gè)時(shí)干燥除去乙腈,稀釋至740 kBq/mL備用。1.4動(dòng)物實(shí) 驗第2期楊順龍等:"1I標記NGR聚乙二醇修飾物及其生物分布.7相做5只小鼠,取其平均值。在BALB/C nu裸鼠右側腋窩皮下用組織包埋的方法接種MCF-7人乳腺癌，接種一周后,腫a)瘤大小約為0. 3~0.5 cm。取6只小鼠,分為兩組,把100 pμL(≈74 kBq)的"I- YGGCNGRCb)|或3I-mPEG00 YGGC NGRC通過(guò)尾靜脈注射,2 h后斷頸處死，取出各臟器和腫瘤,測量放射性計數。c)2結果和討論2.1化學(xué)合成與 標記0 1520 25 30在合成mPEG-CDI時(shí)，由于室溫下1/ minmPEG000在乙醚中溶解度比較小，而mPEG00在乙圖1RPHPLC放射性分析結果醚中具有一定的溶解度,所以mPEGj900 -CDI的產(chǎn)率Fig.1 RP- HPLC profile of 181- YGGC NGRC，較低。采用RP-HPLC法分析181的標記物,并示于181 I-mPEG1g00- YGGC NGRC圖1。純的Na3lI溶液和lodogen與Nal'lI反應and 131 I-mPEG000 YGGCNGRC產(chǎn)物的保留時(shí)間均為1. 8 min;31 I標記的mPEG-(a)- - .3]1- YGGC NGRC ;(b.31 I-mPEGng90- YGGC NGRC:CDI的保留時(shí)間為3.0 min;31I- YGGC NGRC保(c)--- 1-mPEGo00- YGGC NGRC留時(shí)間為5. 0 min;l31I- mPEG1900 YGGCNGRC放射性檢測保留時(shí)間為10. 9 min;31 1-mPEG500-YGGCNGRC ,31- mPEG00- YGGCNGRC和"1I-YGGCNGRC的保留時(shí)間為12. 5 min。l"I 標記mPEG:00- YGGC NGRC在正常小鼠中的分布結果分YGGCNGRC環(huán)肽，標記率大于90 %。用別列入表1~3。從表1看出,31I- YGGC NGRC在RP- HPLC分離后放化純度大于95%。在制備'81腎、消化道、肺和血中初始攝取率較高,且清除較慢。I-mPEG- YGGCNGRC時(shí),為了提高產(chǎn)率,用5胃中濃度很高， 可能是血液中的標記物在胃液的高酸倍摩爾數的PEG-CDI反應物,產(chǎn)率為30 %左右。度下從胃壁毛細血管中滲出。腸中的標記物來(lái)自肝膽分離后,得到放化純度95%以上的產(chǎn)物。排泄和隨胃內容物下行。甲狀腺的初始攝取不高，隨2.2生物分 布結果2.2.1.正常小鼠的生物分布131 I著(zhù)時(shí)間的延長(cháng),標記物上的3I逐漸脫落。由表1可知，部分標記物由腎代謝。表1田1-YGGCNGRC在正常小鼠中的生物分布Table 1 Biodistribution of 131]- YGGC NGRC in normal mice攝取率器官(Organ)中國煤化工5 min30 minMYHC NMH G-4h肝(Liver)3. 98土1.062. 31士0.74⊥.00工U.000. 79士0.41心(Heart) .5. 47士1. 732. 55士0. 661. 69士0.251. 66士0.370. 95士0.35腎(Kidney)8. 64土2.245. 47士2.023. 76士0.892. 67士0.881.79士0.45肺(Lung)6. 82士1.744.54士1.412.60士0.102. 75士0. 751. 54士0.6378核化學(xué)與放射化學(xué)第27卷續表攝取率(Uptake ratio)/(% .g-1)器官(Organ)5 min30 min1h2h4h脾(Spleen)5.02士1. 433. 26士1.052. 09土0.331. 94士0.561. 12士0.35胃(Stomach)15. 98士4.7514. 44士5.248. 52+1.218. 27士3.513. 02士1.77小腸( Small intestine)4.60士1.993. 43士1.322.05士0.031. 57士0.591.02士0.55大腸(Large intestine)3. 40士1.142. 94+0.992. 82士o.671. 73士0.571. 37士0.70肌肉( Muscle)4.45土1.511. 99士0.610. 87士0.101. 33士0.650. 86士0.42血(Blood)9.92士2.466. 48土1. 863. 97士0.143. 77土1.302. 00士0.85腦( Brain)1. 29士0.510. 47士0. 150. 24士0.020. 27士0.04.0. 18士0. 08甲狀腺( Thyroid gland)0. 29士0. 070.71士0. 131.34士0.651. 66士0.392. 43士0.55注(Notes ):n= 5;甲狀腺數據為%( Thyroid uptake expressed in %)表2 B"I-mPECGng0- YGGC NGRC在正常小鼠中的生物分布Table 2 Biodistribution of 131 I--mPEG1900- YGGCNGRC in normal mice攝取率(Uptake ratio)/(% .g1)0 min肝(Liver)3. 97士0.531.56士0.131.41士0.330. 80士0. 220. 35士0.12心(Hert) .2. 62士0.381. 11士0.220.93士0.220.71士0.290.31士0.10腎( Kidney)25. 61土11.327.80士1.136.18士1.853. 10士0.771.99士1.31肺( Lung)4.00士0.84.2. 02士0.192.22士0.64.1. 31士0.360. 66士0.18.2. 11士0. 31.1. 20士0. 151. 36士0.360.89士0.330.44士0. 12.3. 85士1.226. 06士1.23.8. 52士2. 803. 83士1.18.1. 36士0.512. 24士0.651. 22+0.111. 36士0.261.17士0.450.55士0.141. 54士0. 31.1. 11+0. 220. 85士0.171. 43士0. 551.62+1.011. 82士0.27.0.66士0.150.57士0. 120. 34士0.080.21士0.05血( Blood)6. 18士1.04.2.72士0.412. 63士0.61.1. 71士0.54o. 96士0.460.47士0.070.20士0.050.20士0.060. 14士0.070.08士0.05甲狀腺(Thyroid gland)0. 11士0. 020.36士0.190.57士0.301.47士1.161.94士0.38.注(Notes ):n= 5;甲狀腺數據為% ( Thyroid uptake expressed in %)表3 "I-mPEG0 YGGC NGRC在正常小鼠中的生物分布Table 3 Biodistribution of 181 I-- mPEG000- YGGCNGRC in normal mice攝取率(Uptake ratio)/(%●g-1)器官(Organ) .6. 43+1.893. 22+1.861. 38士0.351. 26士0. 300. 70士0.24心( Heart) .3. 28士0. 611. 70士0.900.85+0.300. 51士0.25中國煤化工。腎(Kidney)46. 1士18.8016.33士6.113. 71+1. 04肺(Lung)5. 33士0.942.79士1.12MHCNMH G0.98士0.41脾( Spleen)3. 48士1.35.2.06士0.711. 30士0.30.1.27士0.220. 74士0.315. 40士0. 598. 19士3.746. 12+1. 955. 96士1. 374.36士1.86.2. 60士0.942. 87+1.841. 61士0.38.1.50士0.401.03士0.61第2期楊順龍等:"1I標記NGR聚乙二醇修飾物及其生物分布.79續表攝取率(Uptake ratio)/(%●g-I)器官(Organ) .5 min1h2h4h大腸( Large intestine)2. 15士0.671.70士0.541.11士0. 11.2. 02士0.971.98士0.88肌肉( Muscle)2.57士0.731.56士0.660. 76士0.240.59士0.210.35士0.13血( Blood)8. 22士1.374. 54士1.772. 50士0. 472. 29士0.581. 41士0. 51腦( Brain)0. 54士0.15.0. 35士0.220.16士0.070.19士0.170. 06士0.03甲狀腺( Thyroid gland)0. 17士0.030. 32士0.040.52士0.09.0.93士0.141.23士0.50注(Notes ):n= 3;甲狀腺數據為% ( Thyroid uptake expressed in % )從表1~3看出,用mPEG修飾過(guò)的NGRmPEGs000修飾NGR環(huán)肽(5min時(shí)的攝取率分別環(huán)肽在各個(gè)器官和組織中的攝取率都有所降為(6.2士1.0) %/g和(8. 2士1.4)%/g)與未修飾低,但是在腎臟中的攝取率增高(5 min時(shí)的的NGR(5 min時(shí)為(9.9士2.5)%/g)相比,稍有攝取率(%/g)分別為:31 I-YGGCNGRC下降(P分別為<0.05和>0.05)。從血液清除則無(wú)顯著(zhù)性差別(P>0.05)。Yamaoka 等[6]研究8. 6士2.2;131 I-mPEG100- YGGCNGRC ,26士11;.了mPEG在體內的血液循環(huán)時(shí)間與其分子量的關(guān)系.發(fā)現小分子量的PEG在體內代謝非?？?，131I- mPEG300 YGGCNGRC ,46士19。 后二者與3000分子量的PEG的生物半排期只有18 min,前者的差異分別為顯著(zhù)(p<0.05)和非常顯著(zhù)而大于30000分子量的PEG分子在體內的循環(huán)(p<0.01)。 同時(shí),通過(guò)腎臟代謝的速度似有時(shí)間可以大大延長(cháng),190 kDa的PEG半排期就延加快(30min與5min攝取率之比為:長(cháng)至一天。所以可能采用小分子量mPEG修飾可以縮短環(huán)肽在體內的血清除時(shí)間。Chen 等[7]131I- YGGCNGRC，0. 63土0.29;181 I-mPEGgo-用mPEG2000修飾定位于腫瘤新生血管avβs受體YGGCNGRC,0.30士0. 14;'I-mPEG000-的RGD短肽序列,結果發(fā)現經(jīng)mPEG修飾后的短肽的血清除速度有所加快。另外，由于YGGCNGRC，0.35士0. 20),但無(wú)統計學(xué)意mPEG100分子量更小，代謝更快些,所以器官和義。在肝的初始攝取方面，mPEG900修飾的組織的攝取率比mPEGs00修飾產(chǎn)物更低一點(diǎn)。NGR與未修飾的NGR基本相同(5 min時(shí)的通過(guò)甲狀腺的攝取率比較,經(jīng)過(guò)mPEG1900和攝取率(%/g為:31I- YGGCNGRC ,4.0士1. 1;mPEG:0000修飾的NGR環(huán)肽與未經(jīng)修飾的NGR環(huán)肽在注射后4 h分別為(1.94士0.38),(1. 23土13I- mPEG100- YGGCNGRC，4. 0士0.5 )。但0.50)和(2.43士0.55)%,用mPEG5000修飾NGRmPEGs000修飾的NGR環(huán)肽的肝臟攝取率也有所環(huán)肽顯著(zhù)地(P<0.01)降低了1311的脫落,而用mPEG1900修飾對于抑制31I的脫落作用不大。這提高(P<0.05)(131 I-mPEG000- YGGCNGRC :可能是因為分子量大的mPEG對肽的保護性6.4士1.9),代謝速度沒(méi)有顯著(zhù)性差別(P> 0.05)中國煤化工(30 min與5 min攝取率之比為:!3I- YGGC NGRC.CHCNMHG_布1998年ArapCl等在孔脈佃俁坐中H巫困體展示技術(shù)得到特異結0.58士0.24;131 I-mPEG1900 YGGC NGRC ,0. 39士.合的NGR序列,所以本文考察}31 I- mPEG300-0.06;31I- mPEG00-- YGGCNGRC ,0. 50士0. 33)。YGGCNGRC和13I- YGGCNGRC在荷乳腺癌另外，在血液初始濃度方面，mPEG1900和MCF-7的BALB/C nu裸鼠中的腫瘤攝取。結果核化學(xué)與放射化學(xué)第27卷表4131-mPEG YGGCNGRC和131- YGGCNGRC在荷瘤小鼠中的生物分布Table 4 Biodistribution of 131 I mPEG0- YGGCNGRC and 131- YGGC NGRC in tumor -bearing nude mice :攝取率(Uptake ratio)/(%●g-1)器官(Organ)131I- YGGCNGRC131 I-mPEG000 YGGC NGRC肝(Liver)1. 42士0. 511. 06士0.31心( Heart)1. 16士0.36.0. 75士0. 05腎( Kidney)3.97士0.538.81+1.09肺(Lung)2. 33士0. 741. 83士0.56脾(Spleen)1. 86士0. 750. 84士0.02胃(Stomach) .13.79士1. 992. 42士0. 08小腸( Small intestine)2. 24士0.400.93士0.06大腸( Large intestine)1. 60士0. 291. 03士0. 25肌肉( Muscle)0.79士0.300. 34士0. 09血( Blood)3. 84士1.372. 45士0.04腫瘤( Tumor)2. 79士0. 781. 95士0. 53腦( Brain)0. 23士0. 080. 14士0.06甲狀腺(Thyroid gland)2. 17士0. 800. 48士0.01注(Notes ):n= 3;甲狀腺數據為% ( Thyroid uptake expressed in %);注射后2 h(2 h post injection)列入表4。從表4可看出,31I YGGC NGRC和"1-131I- mPEG1900- YGGCNGRC ,131 I-mPEG000-mPEG:00-YGGCNGRC和在荷瘤鼠中的生物分YGGCNGRC和131I- YGGCNGRC布和在正常鼠中的結果類(lèi)似。注射后2 h,131 I-(2)NGR環(huán)肽在腎臟、胃和血中的攝取率較高,血中的清除較慢。經(jīng)過(guò)mPEG修飾的NGRYGGCNGRC在腫瘤中達到(2.79士0.78)%/g,環(huán)肽提高了在腎臟和肝臟中的攝取率,但是清除而311- mPEG000 YGGCNGRC在腫瘤中的攝取較快,三者的血液清除速度則無(wú)顯著(zhù)性差別。另稍低，為(1.95士0.53)%/g。181 1-mPEGs0外,放射性碘標記的mPEG修飾的NGR環(huán)肽表現出更好的體內穩定性。YGGCNGRC在腫瘤與大多數器官和組織的比( 3 )131 I-mPEGo0-- YGGCNGRC 和131 I-值都比311- YGGCNGRC有所提高,其中腫瘤與YGGCNGRC在荷瘤裸鼠的腫瘤中有一定的攝肌肉的攝取比由3.5士1.7提高到5. 7士2.2,腫瘤與脾的攝取比由1.5士0.7提高到2.3士0.6取,而且31 I-mPEG000- YGGCNGRC的腫瘤與非等,但無(wú)統計學(xué)意義(P>0.05)。修飾與否對腫瘤與靶的攝取比值有所改善,但由于實(shí)驗樣本太小,尚血的攝取比值影響不大(0.73士0.33-→0. 80士0. 22)。無(wú)統計學(xué)意義。該技術(shù)要應用于腫瘤的診斷或治由于實(shí)驗裸鼠的樣本太小(n=3),目前還難以對療仍需要進(jìn)-步的研究和探索。mPEG修飾是否能改善NGR的特異性作出結論。中國煤化工3結論.MHCNMHG[1] Arap w，rasquallni K，Kuoslahti E. Cancer Treat-ment by Targeted Drug Delivery to Tumor V ascula-(1)采用311標記了YGGCNGRC環(huán)肽,并ture in a Mouse Model[J]. Science, 1998， 279:377用分子量1900和5000的單甲基化聚乙二醇對其~ 380進(jìn)行化學(xué)修飾，得到了放化純度大于95%的[2] Pasqualini R，Koivunen E，Kain R, et al. Amin-第2期楊順龍等:"1I標記NGR聚乙二醇修飾物及其生物分布.31opeptidase N is a Receptor for Tumor -homing Pep-rent Molecular Weights After Intravenous Adminis-tides and a Targe for Inhibiting Angiogenesis[J].tration to Mice[J]. J Pharm Sci， 1994,83:601 ~Cancer Res, 2000，60:722~727.606.[3] Curnis F, Sacchi A, Borgna L, et al. Enhancement[7] Chen X Y, Park R, Shahinian A H, et al. Pharma-of Tumor Necrosis Factor an Antitumor Immuno-cokinetics and Tumor Retention of 125 IHlabeled RGDtherapeutic Properties by Targeted Delivery toPeptide are Improved by PEGylation[J]. Nucl MedAminopeptidase N (CDI3)[J]. Nat Biotechnol,Biol, 2004,31:11~19.2000，18:1 185~1 190.8] BeauchampC O, Gionias S L, MenapaceDP, et al.[4] Curnis F, Arrigoni G, Sacchi A, et al. DifferentialA New Procedure for the Synthesis of PolyethyleneBinding of Drugs Containing the NGR Motif toGlycol-protein Adducts; Effects on Function, Re-2D13 Isoforms in Tumor Vessels， Epithelia， andceptor Recognition， and Clearance of SuperoxideMyeloid Cells [J]. Cancer Res， 2002, 62: 867 ~Dismutase，Lactoferrin, and a2 Macroglobulin[J].874.Anal Biochem, 1983，131:25~33._5] Bergers G, Benjamin LE. Tumorigenesis and the An-9] Miron T, Wilchek M. A Simplified Method for thegiogenic Switch[J]. Nat Rev Cancer, 2003. 3: 401 ~Preparation of Succinimidyl Carbonate Polyethylene410.Glycol for Coupling to Proteins [J]. Bioconjugate[6] Yamaoka T, Tabata Y, Ikada Y. Distribution and .Chem, 1993. 4:568~ 569.Tissue Uptake of Poly( ethylene glycol) with DiffeRadioiodination and Biodistribution of PEGylated NGR PeptidesYANG Shun-long, CHU Tai-wei, LIU Xin- qi，WANG Xiang yunDepartment of Applied Chemistry, College of Chemistry and Molecular Engineering,Peking University, Beiing 100871, ChinaAbstract: The NGR peptide is a ligand specifically binding to tumor angiogenic blood vessels, and thushas potential usage in the diagnosis and therapy of tumor. In this study， the cyclic peptideYGGCNGRC is chemically modified by conjugation with a low molecular weight monomethoxy poly-ethylene glycol (mPEG, M. W. 1 900 or 5 000). They are labeled with 131I by using the Iodogenmethod. The biodistribution results in normal mice and mude mice bearing MCF-7 breast carcinomashow that 131 I-PEG1900- YGGCNGRC and 131]I- PEG000- YGGCNGRC have lower uptake in most or-gans and tissues, but higher renal uptake than 131I- YGGCNGRC . Their early uptake in blood is low-ered and their retention kept approximately the same as 131I- YGGCNGRC。The deiodination from131 I-PEG000 YGGCNGRC is significantly lower than from 131]I- YGGCNGRC . Although the tumoruptake of 131I-PEG000- YGGCNGRC is a little bit less中國煤化工the uptake ratio oftumor to normal tissue is increased for most examinedMYHCNMHGcle ratio is increasedfrom 3. 5土1.7 to5. 7士2.2. Modification of cyclic NGR pepuae wIun iir以uwves not remarkably alterthe tumor/ blood ratio. .Key words : tumor angiogenic blood vessels; NGR peptide; PEGylation; radioiodination; biodistribution