刺玫果提取工藝研究

第29卷第5期吉林醫藥學(xué)院學(xué)報Vl29No52008年10月Journal of Jilin Medical CoOct 2008大鼠的體重幾乎是零增長(cháng),而超重輻射保健品組大鼠參考文獻:的體重還表現出了負增長(cháng)現象。這說(shuō)明超重輻射對大鼠的損傷是客觀(guān)的這種損傷很可能導致了大鼠的[1] Oshima M,OhmH, Tateto MM. Hypergravity induc消化吸收功能障礙,從而導致體重減輕;而以林蛙油expression of cyclooxygenase-2 in the heart vessels[J]為主要成分的保健品,很可能具有抑制成年大鼠體重Biochem biophys Res Commun, 2005, 330(3): 928-933增加的效應,這為進(jìn)一步研究該保健品是否具有減肥2.21Mnu,oaoa.Meiy, et效應提供了啟示。微波輻射和超重環(huán)境對機體的損傷是廣泛而復phocytes after exposure in vitro to 1800-MHZ microwave radiation[J]. Mutat Res, 2005, 582(1-2): 42-52.雜的根據其強度和時(shí)間不同,分別可使生物體致死、【3] Chandrasekaran S, Nagarajan S. Microwave-assisted synthe致傷、致殘。長(cháng)期接觸低強度微波輻射,如長(cháng)期使用is and anti-bacterial activity of some 2-amino-6-aryl 4(2-手機的青少年,可出現疲勞、乏力、記憶力降低、耳鳴、thienyl)pyrimidines[ J]. Farmaco, 2005, 60(4): 279-282嗜睡視力下降等癥狀。以吉林長(cháng)白山特產(chǎn)林蛙油為[4] Sun JR,YeYM. Altered behaviour and erpression of Fo主要成分的保健品,可輔助增強機體抑制羥自由基的in rats bom in hypergravity and their re-adaptation to the能力,還具有抑制成年動(dòng)物體重增長(cháng)的趨勢,如果適nomal gravity[J]. Sheng Li Xue Bao, 2001, 53(1): 61-65量服用很可能具有防護超重環(huán)境和微波輻射對機體[5]潘文千,呂士杰曹惠玲,等超重和低氣壓環(huán)境下動(dòng)物的損傷效應。當然,這還需要從整體水平、細胞水平微波輻射的實(shí)驗方法研究[J].吉林醫藥學(xué)院學(xué)報和分子水平進(jìn)行廣泛而深入的綜合研究來(lái)證明。2008,29(2):6365.(收稿日期:200807-26)文章編號:16732995(2008)05025603·論著(zhù)·刺玫果提取工藝研究徐冬梅,雷鉤濤2(1.東北虎藥業(yè)有限公司,吉林吉林132013;2吉林醫藥學(xué)院藥學(xué)院,吉林吉林132013)摘要:約研究刺玫果中總黃的最佳提取工藝。方采用正交試驗設計法,考察溶劑濃度、溶劑用量、回洸時(shí)間、回流次數4個(gè)因素,每個(gè)因素3個(gè)水平,通過(guò)紫外分光光度計檢測總黃酮含量。果乙醇濃度對總黃酮含量有顯著(zhù)影響,乙醇用量影響最小。論最佳提取工藝為6倍量75%乙醇,回流3次,每次回流5 h關(guān)鍵詞:刺玫果;提取工藝;正交試驗中圖分類(lèi)號:TQ460.6文獻標識碼:AStudy on extraction process of Fruit of Dahurian RoseXU Dong-mei, LIE Jun-tao(1. Northeast Tiger Pharmaceutical, Jilin City, Jilin Province, 132013; 2. Jilin MedicalCollege, Jilin City, Jilin Province, 132013, China)Abstract: Objective To optimize the extraction process of Fruit of Dahurian Rose. Methods The optimum extrac-tion was investigated by the orthogonal design and determined by中國煤化工 ant of solvent,emcCNMHG通訊作者:雷釣濤(190-),男(漢族)副教授碩士作者簡(jiǎn)介:徐冬梅(1971-),女(漢族)工程師本科第5期徐冬梅,等.刺玫果提取工藝研究tion hour, extraction times were the four factors in the experiment, and three levels of each factor were chosen to be in-spected to optimize the process. Results The concentration had the most significant and the amount of solvent hadthe least effect on the content of Flavonoids. Conclusion The best extraction process was to reflux three times withtimes EtOH(75%)for 5.0 h eadKey words: Fruit of Dahurian Rose; abstraction process; orthogonal desig刺玫果學(xué)名野薔薇,又名野刺玫果、山刺玫果,薔副教授鑒定為薔薇科薔薇屬山刺玫 Rosa davurica薇科薔薇屬多年生落葉灌木始載于《中藥大辭典》Pa的干燥成熟果實(shí)。蘆丁標準品(上海融禾醫藥和《東北藥用植物》中,是我國高等植物之一,廣泛分科技有限公司,批號:080116),所用試劑均為分析布于黑龍江、吉林、遼寧內蒙古、河北、山西等地。本純。品野生資源豐富,文獻記載有很好的藥理作用,果實(shí)1.2樣品的制備性溫味酸,營(yíng)養豐富,民間大量采食或用于泡茶、泡稱(chēng)取藥材粗粉20g,粉碎過(guò)40日篩,置于圓底燒酒等,《中藥大辭典》謂其有健脾理氣、養血調經(jīng)的作瓶中根據試驗列號所列條件提取濾過(guò),合并濾液用2刺玫果中主要含有黃酮類(lèi)有機酸香豆素濾液于50℃濃縮。類(lèi)、甾醇、三萜類(lèi)、復烯烴類(lèi)、皂苷、蛋白質(zhì)、糖類(lèi)胎肪采用正交試驗法,考慮的主要影響因素如下:乙油揮發(fā)油4和17種氨基酸其中包括蘇氨酸纈醇濃度、乙醇用量回流時(shí)間回流次數。按L(3)酸、異亮氨酸亮氨酸、甲硫氨酸苯丙氨酸及賴(lài)氮酸試驗列號所列條件提取,以總黃酮含量為指標確定等7種人體必需氨基酸;含有28種元素其中包括最佳提取工藝(見(jiàn)表1)。鋅、鐵硒等14種人體必須的微量元素,特別是鋅的含量很高經(jīng)國家衛生部臨床檢驗中心檢驗,每百克表1L,(3)因素水平表實(shí),號稱(chēng)“生命之花”;同時(shí)還含VAVC、vE、wB、水平A劑濃度B劑用量C國流時(shí)間D流次數果中鋅的含量為1943mg,其含量高于其他植物果(倍)(h)(次)VB2VP、B胡蘿卜素等多種維生素,其中V含量最高。市場(chǎng)上已出現由該果汁為主研制的保健食品及保健飲料,臨床已研制出以刺玫果為原料的注射液及口服液。市場(chǎng)上對治療心血管疾病的藥品需求量很大,刺玫果中所含的總黃酮類(lèi)物質(zhì)具有預防和治療高血脂血栓所致的心腦血管疾病的功效,1.3標準曲線(xiàn)的繪制且具有高效低毒副作用的優(yōu)勢。為了提高對該藥材精密稱(chēng)取干燥至恒重的蘆丁對照品9.3mg,置質(zhì)量的控制我們采用正交試驗法以蘆丁為標準品對25ml量瓶中,加60%乙醇溶解至刻度,搖勻,即得刺玫果中總黃酮提取進(jìn)行研究為提取刺玫果中有效對照品溶液。精密吸取對照品溶液0.0、0.3、0.5、物質(zhì)提供一定參考。0.8、1.0、1.3、1.5、1.8、2.0ml,分別置10ml量瓶中加60%乙醇溶液至5ml,精密加入5%亞硝酸鈉1材料與方法0.3ml,搖勻,放置6min,再精密加入10%三氯化鋁溶液0.3ml,搖勻,放置10min,再加入4%氫氧化鈉11儀器和材料溶液4ml,最后加60%乙醇至刻度,搖勻,放置紫外分光光度計(UV00型,中國,北京瑞利分10min,置比色杯中。以60%乙醇為對照品,于400析儀器公司);旋轉薄膜蒸發(fā)儀(RE52AA型,中國,600m間掃描,在502m處有最大吸收,用紫外分上海亞榮生化儀器廠(chǎng));循環(huán)水式真空泵(SHZD,中光光度計在此波長(cháng)處測吸光度(見(jiàn)表2),繪制標準曲國鞏義市予華儀器有限責任公司),電子天平(沈陽(yáng)線(xiàn),中國煤化工丁標準品溶液在龍騰電子有限公司);數控超聲波清洗器(KQ-100DB1.16性關(guān)系良好。以型,中國昆明市超聲儀器有限公司)。吸光CNMHG行線(xiàn)性擬合,回歸刺玫果,購于藥材市場(chǎng),由吉林醫藥學(xué)院雷鉤濤·方程為:y=0.0114x-0.0103,y為吸光度,x為濃度畝林醫藥學(xué)院學(xué)報2008年10月第29卷r=0.9995。3討論衰2蘆丁濃度與吸光度的關(guān)系通過(guò)對正交試驗結果分析,可以看出,影響刺玫序號濃度(/ml)果提取的因素主次順序為:乙醇濃度>回流時(shí)間>回11.16流次數>乙醇用量。乙醇濃度對總黃酮影響顯著(zhù),乙18.60醇濃度低,不利于有效成分浸出完全,乙醇濃度高使29.760.32雜質(zhì)量增加,75%的乙醇對刺玫果苷含量影響最大;37200.4010.533提取時(shí)間和次數對刺玫果中總黃酮含量影響較大;乙55.800.623醇用量對其含量也有一定影響,乙醇用量對總黃酮提取率影響最小,乙醇用量少,總黃酮溶解少、提取不充74.40分,用量過(guò)大,可能有吸附現象,使總黃酮有一定損失。由此可知,刺玫果最佳提取工藝為:AB2C3D1,即乙醇濃度為75%,溶劑用量為6倍量,回流3次,14刺玫采中總黃酮的測定每次回流5h。精密稱(chēng)取提取物干膏0.165g,置50m1容量瓶本實(shí)驗采用正交設計進(jìn)行試驗,為從刺玫果果實(shí)中用乙醇溶解并定容至刻度精密量取5m置中提取總黃酮類(lèi)成分提供了科學(xué)、合理的理論依據。25m容量瓶中,用乙醇定容至刻度,以乙醇為空白對照用紫外分光光度計在502m處測定吸光度根據◆考文獻:標準曲線(xiàn)計算刺玫果提取液濃度。[1]江蘇新醫學(xué)院中藥大辭典(上冊)[M].上海:上海人民出版社1977:7,754.[2]黑龍江省藥品監督管理局鼎龍江中藥材標準[S]刺玫果中總黃酮的測定結果見(jiàn)表3。由表3可2001:114.知影響總黃酮提取的因素的主次順序為:乙醇濃度[3]俞作仁,王文莉呂娟濤刺玫果化學(xué)成分及藥理作用研>回流時(shí)間>回流次數>乙醇用量。以總黃酮百分充進(jìn)展[J]中草藥2002,3(2):188190含量為指標最佳提取條件為AB2C2D,即乙醇濃度[4]王群,陳雅研山刺玫果研究進(jìn)展[J中國中藥雜志,為75%,溶劑用量為6倍量,回流3次,每次回流5h1997,2(3):131-134.[5]賈洪斌樸貴金徐秀廷,等刺玫果中氨基酸組成及含2L(3)正交試驗結果量的測定[門(mén)]內蒙古民族師院學(xué)報:自然科學(xué)版,1997,12(1):7880.BD總黃酮含量(%)C123[6]杜英華陳保國賈洪斌刺玫果營(yíng)養成分的分析測定[J].內蒙古石油化工,2002,28(4):242519.0[7]王曉燕李雪琴應縣野生刺玫果營(yíng)養成分分析及評價(jià)23.8[J]科技情報開(kāi)發(fā)與經(jīng)濟,2004,14(5):140-14130.729.3[8]張國貞李芳蘭,張金梅野生刺玫果營(yíng)養成分分析及評26.6價(jià)[打]食品研究與開(kāi)發(fā)001,22(6):3840.1.0[9]黃學(xué)文烏云龍大興安嶺北部林區野果資源及保護利用中國野生植物資源,2007,26(2):39421.3[10]王萍殷麗君楊金燕刺玫果人參保健飲料的研制T10.690.3870.5m0.618[J]中國林副特產(chǎn),200(3):9100.8670.5630.4670.511[1]于玲史鳳英吳景時(shí)山刺玫果對心臟及保護心肌Ty0.1050.52006280.542中國煤化工產(chǎn),00(11617.0.7620.0670.2740.107[12]CNMHG急性血瘀模型大鼠血陶皿脂人飄陣脂作用的研究[J].中國藥物與臨床,2007,7(6):44749第29卷第5期吉林醫藥學(xué)院學(xué)報Vol.29No52008年10月Journal of Jilin Medical Collegect.2008[13]于玲媛,史鳳英,吳景時(shí)山刺玫果對血清膽固醇的作然科學(xué)版,2005,6(3):28-230.用研究[中國林副特產(chǎn),2005(3):37[14]焦淑萍,楊春玫,初秋等.山刺玫果降血脂抗氧化及(收稿日期:20080906)保護血管內皮功能的實(shí)驗研究[].北華大學(xué)學(xué)報:自文章編號:1673-2995(2008)05025904論著(zhù)維生素C和E聯(lián)合應用對酒精損傷睪丸超微結構的影響李宏宇,鄧晶,朱玉萍2,張建霞,田洪艷,李質(zhì)馨°(吉林醫藥學(xué)院:1.臨床醫學(xué)院2護理學(xué)院3組織學(xué)與胚胎學(xué)教研室,吉林吉林132013)目的觀(guān)察維生素C(VC)和維生素E(VE)聯(lián)合應用對酒精(ALC)損傷睪丸超微結構的彩響。方油年昆明種小鼠50只,隨機分為5組:正常組、酒精組、酒精+VC組、酒精+VE組和酒精+VC+VE組,連續灌胃23d。應用光鏡和透射電鏡觀(guān)察睪丸組織的結構變化。結果與正常組相比,酒精組多數生精細胞核固縮,核膜模糊不清,支持細胞數量較少,細胞器結構異常;與酒精組相比,酒精+VC組多數生精細胞形態(tài)趨于正常,胞質(zhì)內可見(jiàn)較多細胞器,支持細胞數量較多,細胞器豐富;酒精+VE組多數生精細胞固縮,細胞間隙大小不等,支持細胞數量較多,結構良好,趨于正常;酒精+VC+VE組多數生精細胞結構良好,核膜清晰,細胞器較多,支持細胞較大,核清晰,線(xiàn)粒體和溶酶體較多。結論Ⅴ和ⅤE聯(lián)合應用可拮抗酒精的毒害作用,對生精小管結構具有保護作用。關(guān)鍵詞:酒精;睪九;維生素C;維生素E;超微結構中圖分類(lèi)號:R321.1文獻標識碼:AThe effects of the jOint application of vitamin C and vitamin E on the ultrastructure of testis in alcohol-injured miceLI Hong-yu', DENG Jing, ZHU Yu-ping, ZHANG Jian-xia, TIAN Hong-yan, LI Zhi-xin(Jilin Medical Col-lege: 1. Clinical Medicine College, 2. Nursing College, 3. Department of Histology and Embryology, Jilin City, JilinProvince, 132013, China)Abstract Objective To observe the effects of a joint application of vitamin C and vitamin E on the ultra structureof testis in alcohol-injured mice. Methods Fifty mature mice were divided into five groups at random: the controlgroup; the alcohol group the alcohol and vitamin C group; the alcohol and vitamin E group; the alcohol, vitamin C andvitamin E group. The control group was given distilled water. The other four groups were exposed to aldsame time, the alcohol and vitamin C group was given vitamin C, the alcohol and vitamin E group was given vitamin E,the last group was given both vitamin C and vitamin E Distilled water, alcohol, vitamin C and vitamin E were given byintragastric administration for 23 days. Light microscope and transmission electron microscope were used to detect thestructure of the testis. Results Compared with the control group, nuclear-pycnosis appeared in most spermatogeniccells of the alcohol group. The number of Sertoli cells decreased The structure of organell was abnormal. Compared中國煤化工基金項目:吉林醫藥學(xué)院大學(xué)生科研基金資助項目(吉醫學(xué)科字[2005]第5號)CNMHG通訊作者:李質(zhì)馨(1962-),女(漢族)教授從事生殖醫學(xué)研究作者簡(jiǎn)介:李宏宇(1985-),男(漢族)在讀本科生