面粉增筋劑聚丙烯酸鈉中聚丙烯酰胺的測定

第26卷第4期Vol. 26,No.4F 00D&MACHINERY2010年7月July，20 1010. 3969/J isn 1003一5788.2010 04. 020面粉增筋劑聚丙烯酸鈉中聚丙烯酰胺的測定Determination of polyacrylamide in sodium polyacrylate in flour gluten fortifier黃紅霞HUANG Hong-tia(福建省中心檢驗所，福建福州350002)(Fujian Provincial Central Inspection Institute, Fuzhou, Fujian 350002, China)摘要:研究建立熒光衍生劑氯甲酸芴甲酯(FM0C-CI)柱前衍的面團,表面光滑而具有光澤;②形成穩定的面團膠體，防止生,高效液相色譜熒光檢測器檢測面粉增筋劑聚丙烯酸鈉中可溶性淀粉滲出;③增加產(chǎn)品的保水性,使水分均勻保持于聚丙烯酰胺的檢測方法。樣品經(jīng)水提取,在弱堿性條件下通面團中,防止干燥;④提高面團的延展性;⑤使原料中的油脂過(guò)FMOC-CI衍生,經(jīng)二醇基柱分離,并以熒光檢測器測定。成分穩定地分散至面團中,制作以小麥粉、紅薯、玉米、燕麥、.結果表明:該方法聚丙烯酰胺檢測限為0.2 g/kg;樣品回收馬鈴薯等為原料的鹵條、粉絲、粉條、粉皮時(shí),可提高產(chǎn)晶品的率為85. 5%~90.9% ,相對標準偏差(RSD)為3. 1%~4.7%筋力,增強耐煮性[1-8]。(n=6),在4.28~428 μg/mL濃度范圍內呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，線(xiàn)性回歸系數r大于0. 999.聚丙烯酰胺簡(jiǎn)稱(chēng)PAM,由丙烯酰胺單體聚合而成,是- -關(guān)鍵詞:柱前衍生;高效液相色譜熒光法;聚丙烯酸鈉;聚丙種水溶性線(xiàn)型高分子物質(zhì)。主要用作絮凝劑,用于石油工烯酰胺業(yè).紡織工業(yè)、造紙工業(yè)等[3-1。聚丙烯酰胺常含有丙烯酰.胺單體,丙烯酰胺具神經(jīng)毒作用,可引起疲嗜睡.手指麻木，with FLD detection of polyacrylamide(PAM) in sodium polyacrylate位置性震顫，步態(tài)紊亂,肌肉萎編,肌肉尤力,手出汗脫屑以(PAANa), The flour gluten forifier-PAANa samples were extractedby water and pre column derivarization with FM0C-C. HPIC sepa-及接觸性皮炎等凹,屬中等毒類(lèi),具有生殖毒性、致突變性、ration was performed on YMC-Pack Diol-300 column (8. 0 X致癌性。因此,中國明確規定聚丙烯酰胺不允許作為食品添300 mm.5 μm) and the fluorescence detection was used. Conclu-加劑使用(6)。但由于聚內烯酰胺具有比聚丙烯酸鈉更好的.sion; The detection limit was about 0. 2 g/kg . The recoveries增筋效果,一些不法廠(chǎng)家為S使自己的產(chǎn)品更好銷(xiāo)售,不顧ranged from 85. 5% to 90. 9%，and the relative standard deviationswere3.1%~4.7% (n- 6). The linear range was 4. 28μg/mL ~國家標準的規定違規使用聚丙烯酰胺來(lái)代替聚丙烯酸鈉。428 ug/mI, and the correlation coefficient (R) was over 0. 999.目前,檢測聚丙烯酰胺的方法有溴氧化一可見(jiàn)光譜法[]、凝Keywords: pre column derivaization; HPLC-fluorescence detection;膠色譜分析方法0等。但溴氧化-可見(jiàn)光譜法測試的干擾sodium polyacrylate; polyacrylamide因素多、步驟繁瑣、測試精確度低、應用范圍窄,由于聚丙烯面粉增筋劑是一類(lèi)與蛋白質(zhì)(面筋)聯(lián)結以改進(jìn)面粉制酰胺和聚內烯酸鈉的部分分子最有交叉,采用凝膠色譜分析品品質(zhì)的添加劑,包括改進(jìn)面筋的機械加工性能、氣體保留方法也難以分離鑒定。性能及血制品的體積.勻稱(chēng)性.組織結構和顆粒等。主要由本試驗通過(guò)熒光街生劑氯甲酸芴甲酯(FM0C-CI)柱前聚丙烯酸鈉、偶氨甲酰胺、活性磷酸鹽、變性淀粉等原料衍生，高效液相色譜熒光檢測器檢測,建立了面粉增筋劑聚丙烯酸鈉中聚丙烯酰胺含量的測定方法。該方法抗干擾性制成。驟丙烯酸鈉簡(jiǎn)稱(chēng)PAANa,是一種水溶性樹(shù)脂,分子最數強,重現性好,靈敏度商,為產(chǎn)品質(zhì)量執法與檢驗提供了技術(shù)百萬(wàn),無(wú)色或淡黃色粘稠液體,在面制食品中作為增筋劑有方法和依據。如下功效:①增強原料面粉中的蛋白質(zhì)黏結力,使淀粉粒子中國煤化工相互結合,分散滲透至蛋白質(zhì)的網(wǎng)狀結構中,形成質(zhì)地致密1.11HCNMHG高效液相色譜儀Alliance" 2695(配2475熒光檢測器)，作者簡(jiǎn)介:黃紅霞(1965 - ),女,福建省中心檢驗所高級工程師。美國沃特世公司;E-mil.hy@fei. net收稿日期:2010-02- 20電子分析天平:BT 224S,德國賽多利斯;73安全與檢測2010年第4期渦旋混勻器:XH-B型,江蘇康鍵醫療用品有限公司;FMOC-CI的術(shù)生化條件"]和Waters公川氦基酸的accq-tag高速離心機:TGL-16B,上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng):街生化條件[1]對聚丙烯酰胺術(shù)生后進(jìn)行檢測。分別采用試驗用水:MilliQAcademic超純水發(fā)生器制備的超Crn色譜柱.TSK, G4000PW凝膠色譜柱和YMC-Pack Diol純水;二醇基柱來(lái)分離兩種衍生刪的衍生產(chǎn)物，結果只有采用乙腈:色譜純,山東禹王;FMOC-CI術(shù)生的產(chǎn)物能通過(guò)YMC-Pack Diol 二醇基柱來(lái)有硼砂:分析純,國藥集團;效分離。采用YMC-Pack Diol-300,5 μm,300X8.0 mm LD二氯甲烷;分析純,國藥集團;色譜柱,試驗同時(shí)比較了用0,0. 05,0. 075.0. 1,0. 15 mol/L .丙酮:分析純,國藥集團;磷酸二氫鉀溶液為流動(dòng)相的分離效果并調節與乙腈的比例，氯甲酸芴甲脂(FMOC- CI)術(shù)生劑:美國Fluka公司;最終確定以0. 075 mol/L磷酸二氫鉀溶液'乙腈= 96:4為聚丙烯酰胺(含量≥85.0% ,平均分子量≥300萬(wàn)):國藥流動(dòng)相,流速為1.0 mL/min,柱溫為30 C ,在該條件下驟丙集團;烯酰胺衍生產(chǎn)物與雜質(zhì)能有效分離并具有良好的靈敏度.聚丙烯酸鈉(固含量≥40.0%,分子量≥3X10'):國藥采用Waters2475 熒光檢測器掃描后發(fā)現在激發(fā)波長(cháng)集團。268 nm.發(fā)射波長(cháng)315 nm處,聚丙烯酰胺衍生產(chǎn)物具有最1.2 方法大響應值(見(jiàn)圖1,圖2)。水、聚丙烯酸鈉和聚丙烯酸鈉添加1.2.1聚丙烯酰胺標準溶液準確稱(chēng)取 20.0 mg聚丙烯酰聚丙烯|酰胺的街生物分離譜圖見(jiàn)圖3.胺標準品,加入80 ml.水,超聲30 min, 放置過(guò)夜,用水定容2 00.00至100 mL,混合擁勻,準確移取適最標準貯備液,用水稀釋.268成4~400 pg/ml.的標準系列。100001.2.2樣品處理方法 稱(chēng)取0, 200~0.500 g樣品,置于100mL容量瓶中,加人80mI.水,超聲提取30min,放置過(guò)200.00 250.00300.00夜充分分散,加水定容并播勻,倒入2 mL離心管中掃描波光Wavelengh/m15000r/min離心5min,準確移取400μL上清液于2mL.(a)激發(fā)光譜離心管中,依次加入200μL5%硼砂溶液和200uL1g/L氯2 00甲酸芴甲酯(FMOC CI)內閘溶液,渦旋混勻,放置10 min,加315入500μ二氯甲烷渦旋舉取1 min,15 000 r/min 離心1 00.0.5min,吸取上.層溶液用0.45μm尼龍濾膜過(guò)濾后測試。1.2.3 標準品處理方法 準確移取 400山標準溶液于0300.00 350.00 400.00 450.002 ml,離心管中,加入200 μ.5%硼砂溶液和200 μL 1 g/L .氯甲酸芴甲酯(FM0C-CI)丙酮溶液,渦旋混勻,放置10 min,Wavelength/m加人500 μ二氯甲烷渦旋萃取1 min,15 000 r/min離心(b)發(fā)射光譜5min,吸取上層溶液用0.45um尼龍濾膜過(guò)濾后測試。圍1聚丙烯酰胺 標準品1.2.4液相色請分析條件 色 譜柱: YMC-Pack Diol 300,Figure 1 The extraction spectra5 μm, 300X8.0 mm1. D. ;柱溫:30心;熒光檢測波長(cháng):激發(fā)100.00波長(cháng)為268 nm,發(fā)射波長(cháng)為315 nm;進(jìn)樣量:20 μL;流速:1.0 mL/min;流動(dòng)相:0. 075 mol/L磷酸二氫鉀溶液:乙事50.00腈=96: 4;洗脫方式:等度洗脫。2結果與討 論s.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.002.1 色譜條件選擇保留時(shí)間由于聚丙烯酰胺分子量較大月極性較強,在Cs色譜柱Relention time/min上難以保留.無(wú)法進(jìn)行有效分離檢測。有報道"采用250 x團2聚丙烯酰胺標準品液相色譜困4. 6 mm Diol 二醇基柱來(lái)檢測棗丙烯酰胺濃度,檢測波長(cháng)為HPI C rhromatnoram of standard sample200 nm,但在該波長(cháng)下,對基質(zhì)較復雜的樣品極易產(chǎn)生干擾。中國煤化工M)因此.最好能尋找到一種能與聚丙烯酰胺反應生成穩定熒光DYHCNMHG產(chǎn)物的試劑。FMOC-CI 和Waters accq-tag街生劑作為常用2.2“朋處璀錄什匹焊的氨居酸街生劑L0] ,能與氨基反應生成穩定的熒光產(chǎn)物。2.2.1提取方法 聚丙烯酸 鈉和聚丙烯酰胺均易溶于水，本試驗參照SN/T 1923-- -2007 標準中草廿膦使用由于分子量較大,在水中的分散速度均較慢。試驗表明經(jīng)敢74第26卷第4期黃紅霞:面粉增筋劑聚丙烯酸鈉中聚丙烯酰胺的測定置過(guò)夜后聚丙烯酸鈉和聚丙烯酰胺水溶液均成為均勻的、幾積為縱坐標 ,濃度為橫坐標做標準工作曲線(xiàn)，得到聚丙烯酰近透明的粘稠液體。為了加快聚內烯酰胺的溶出,采用先超胺的線(xiàn)性方程為A= 24 900.C+76.8,r=0.99989.檢出聲振蕩30 min再放置過(guò)夜分散的提取方法。由于聚丙烯酸限以信噪比S/N為3時(shí)對應的目標物依度確定,當取樣量為.鈉和聚丙烯酰胺溶液在濃度較大時(shí)成為非常粘稠的液體,無(wú)0.2g時(shí),該方法對面粉增筋劑中 聚丙烯酰胺的檢測限為法用濾膜過(guò)濾,直接進(jìn)樣會(huì )造成色譜柱堵塞,因此,將樣品取樣量定為0. 200~0.500 g.， 50.0050.005.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00保留時(shí)間Retention time/min(a)聚丙烯酰胺衍生后未經(jīng)凈化a) HO5.0010.00 15.00 20.00 25.00 30.0Retenton timemnin(b)聚丙烯酰胺衍生后用CHCI2凈化(b)聚丙烯酸鈉(PAANa)圖4聚丙烯酰胺衍生反 應液凈化前后液相色譜圖比較Figure 4 HPLC chromatogram of derivatizationreaction solutions of PAM2.4回收率和精 密度試驗Relention time/mnin取空白增筋劑聚丙烯酸鈉樣品進(jìn)行標準添加試驗，每個(gè)(e)聚丙烯酸鈉添加驟內烯酰胺添加量做6個(gè)平行試驗,試驗結果見(jiàn)表1.圈3純水、聚丙烯酸鈉空白樣 品和聚丙烯表1空白增筋劑樣品的加標回收率和精密度Table 1 The recovery and precision in the flour gluten酰胺空白加標液相色譜圖fortifier (PAANa) sample(n= 6)Figure 3 HPLC chromatogram of H2O (a),PAANa sample(b) and spiked舔加濃度/實(shí)測濃度/回收率/相對標準sample of PAANa with PAM (c)(g.kg-1)(g.kg-")%偏差/%2.141.8385. 54. 72.2.2街生化時(shí)間和行生產(chǎn)物穩定性 本試驗 研究了衍生10. 709.4087. 93.8時(shí)間的選擇,發(fā)現衍生10,30min和24h所得聚丙烯酰胺峰42. 8038. 9090.93.高均相同,因此確定衍生時(shí)間為10min,衍生產(chǎn)物穩定時(shí)間在24 h以上。2.5實(shí)際樣晶檢測2.2.3 凈化方法 FMOC-CI作為柱前衍生化試劑具有一采用該方法抽取面制品加工企業(yè)共計20份添加劑樣品個(gè)明顯的缺點(diǎn)就是在水溶液中過(guò)量的FMOC-CI水解成進(jìn)行了檢測,共檢出了3份含聚丙烯酰胺的樣品,含載在FMOC-OH和二?；a(chǎn)物[0],對檢測構成很大的干擾。本42%~85%之間。試驗研究發(fā)現,采用二氣甲燒萃取的方法-次就能有效降低3結論過(guò)量衍生劑的干擾(見(jiàn)圖4).通過(guò)熒光街生劑氯甲酸芴甲酯(FM0C-CI)柱前衍生,高2.2.4 抗干擾能力 為檢驗該方法的抗干擾能力,對增筋效液相色譜熒光檢測器檢測.建立了面粉增筋劑聚丙烯酸鈉劑中常用的偶氮甲酰胺、活性磷酸鹽、變性淀粉、黃原膠等添中聚內中國煤化工操作簡(jiǎn)單、抗干擾能加劑依照該方法條件進(jìn)行試驗，發(fā)現上述添加劑均不蟛響聚力強、:[H.CNMHG品衛生質(zhì)量檢驗部丙烯酰胺的檢測。門(mén)對面材增肋則策內儷酸鋼中策內師酰胺的快速檢測,為嚴2.3標準曲線(xiàn)繪制 與檢測限格食品添加劑質(zhì)最監管，保障人民健康提供了必要的技術(shù)配制4.28~428pg/mL的聚丙烯酰胺標準溶液,以峰面支持。(下轉第119頁(yè))75第26卷第4期梁茂文等:添加果酒復合型乳酸菌飲料的研制2.3產(chǎn)品質(zhì)量指標 .加劑,2009(1);114~117.3張學(xué)佳,紀巍,康志軍,等.橐丙烯酰胺應用進(jìn)展[J].化工中間體，2.3.1感官指標2008(5);34~38.產(chǎn)品呈淡黃色;具有發(fā)酵乳的乳香.南瓜蘋(píng)果的果香、以4張學(xué)佳,紀巍,康志軍，等.聚丙烯酰胺的特性及應用[].化學(xué)工及略微的酒香,酸甜適口、質(zhì)地細膩、柔和夷口,無(wú)異味;均勻業(yè)與工程技術(shù), 2008,29(5):45~49.細膩.無(wú)分層,無(wú)凝塊。5楊文友.食品中丙烯酰膠的特性及危害[J].肉晶衛生2002(11);2.3.2理化指標22~26.蛋白質(zhì)含量≥1.0% ;脂肪含量≥1.0%;酸度≥70°T;酒6王茂起. GB 2760-- - 2007中華人民共和國食品添加劑衛生標準精度為0.6%.[S].北京:中華人民共和國衛生部, 2007.2.3.3微生物指標? 李坤蘭.龐軍,王桂霞,等.溴氧化-可見(jiàn)光譜法測定水溶液中聚細菌總數≤100 CFU/mL;大腸菌群≤3 MPN/100 mL;丙烯酰胺含量[J].造紙化學(xué)品,999(2);8~11.3 葉美玲,韓東,施良和,等.凝膠色譜法定量分析污水中聚丙烯酰致病菌未檢出。胺[J].色譜，1995.13(1);16~19.2.3.4保質(zhì)期) 冉福強,何建華,李睿姍,等.高效液相色譜儀檢測聚丙烯酰胺濃4 C冰箱保存21 d. .度的方法研究UJ]江漢石油科技，2006,16(2);1~4.3結論10 劉媛,謝孟峽,龍梅,等. FMOC-CI為柱前術(shù)生試劑對氨基酸的RP- HPLC定量分析方法的研究[J].現代儀器, 1999(6);14~(1)最優(yōu)復合果蔬汁發(fā)酵條件為:南瓜;蘋(píng)果= 1:3,接種量8%,發(fā)酵天數3d,糖度為8 Brix。(2)復合型乳酸菌飲料的最佳配方為;酸奶32. 0%復11 李波. SN/T 1923- 2007進(jìn)出口食品中草甘腆殘留量液相色譜一質(zhì)譜/質(zhì)譜法[S].北京:中華人民共和國國家質(zhì)量監督檢合發(fā)醇果汁8.0%、蔗糖10.0%、復合酸(檸檬酸:蘋(píng)果酸:驗檢疫總局,007.Vc= 8:10.5)0.14% ,復合穩定劑(CMC:黃原膠= 2:1)12 Waters中國有限公司。Wates液相色譜通訊- AccQ. Tag專(zhuān)集0.30%.產(chǎn)品呈淡黃色,口感細膩.潤滑,并具南瓜蘋(píng)果香、[M].北京:沃特斯中國有限公司,1997.酒香及奶香等多種特殊香味。信息窗參考文獻1王洪偉,徐雅琴. 南瓜功能成分研兗進(jìn)展[J].食品與機械2004,研究人員發(fā)現-些腸道細菌20(4).55~57.可產(chǎn)生減肥效果2丁云花. 南瓜的食療保健價(jià)值及開(kāi)發(fā)前最[J].中國食物與營(yíng)養，1998(6) :49.比利時(shí)研究人員近期研究發(fā)現.益生菌等一些腸道3張紅印,王蘭.南瓜蘋(píng)果復合果蔬汁飲料的研究[J].鄭州糧食學(xué)細菌能影響人們的食欲和新陳代謝。人們今后可以通過(guò)院學(xué)報,2001(3) :58~59.4胡亞平,秦丹,李清明.黃瓜圣女果復合汁乳酸發(fā)酵飲料的研制定期服食特定食品或食晶添加劑,通過(guò)調節腸道內的細菌種類(lèi)和數量,達到控制體重的目的。[J]. 食品與機械，006.22<2)250~52.魯汶天主教大學(xué)的研究人員通過(guò)多年的研究發(fā)現,5盧蓉蓉,楊毅,楊瑞金. 胡夢(mèng)卜計乳酸菌飲料的加工工藝[J].食品.某些腸道細黹在腸道里控制眷內大麻醇的產(chǎn)生,而內大與機械,2006 ,2(4);106~ 108.111.16李紅梁,黃俊榮 ,禹露.食品添加劑對乳酸菌飲料穩定性及口感的麻醇可以影響饑餓感和脂肪細胞里脂肪的堆積程度。研究人員把實(shí)驗鼠分為兩組:一組食物里加人益生影嘲[J].食品工業(yè),2004(6);39. ,7劉鐵鋼,趙志新，趙風(fēng)蘭. 飲料質(zhì)量檢驗[M].北京:中國計量出版菌,另一組則不添加作為對照組。喂養-段時(shí)間后,研究社,1998.213~230.人員對兩組實(shí)驗鼠的有關(guān)肥胖指標進(jìn)行分析發(fā)現,益生8周玉珠.正交試驗設計的矩陣分析方法[J].數學(xué)的實(shí)踐與認識，菌蟛響實(shí)驗鼠的內大麻醇系統。也就是說(shuō),喂食益生菌2009<2) :202~207.的實(shí)驗鼠身體比較“苗條"。研究人員表示，如果這項實(shí)驗在人身上得到驗證,那么體重超標的人今后只要服用添加腸道細菌的特定(上接第75頁(yè))中國煤化工目的。子系統生物學(xué)>雜1徐丹,董學(xué)亮 ,劉明，等.聚丙烯酸鈉增樹(shù)劑的特性及用途[J].河志上MHCNMHG南科學(xué)，2005,23(6):810~812.(來(lái)源:新華網(wǎng))2周宇光,付國平.食用聚丙烯酸鈉的特性及應用[J].中國食品添119